222 lượt xem

Cfu là gì? Định nghĩa Cfu – Khoa học & Đời sống | Uyên My

Cfu là gì – Trong vi sinh vật , một đơn vị tạo khuẩn lạc ( CFU, cfu, Cfu ). Là một đơn vị được sử dụng để ước tính số lượng vi khuẩn sống sót hoặc các tế bào nấm trong một mẫu. Khả năng được định nghĩa là khả năng nhân thông qua phân hạch nhị phân trong các điều kiện được kiểm soát. Đếm các đơn vị hình thành thuộc địa đòi hỏi phải nuôi cấy các vi khuẩn. Và chỉ đếm các tế bào sống sót. Trái ngược với việc kiểm tra bằng kính hiển vi đếm tất cả các tế bào, sống hay chết.

Sự xuất hiện trực quan của một thuộc địa trong nuôi cấy tế bào đòi hỏi sự tăng trưởng đáng kể. Và khi đếm các khuẩn lạc thì không chắc chắn nếu thuộc địa xuất hiện từ một tế bào hay một nhóm tế bào. Biểu thị kết quả như các đơn vị hình thành thuộc địa phản ánh sự không chắc chắn này.

Lý thuyết về Cfu là gì

Một pha loãng được thực hiện với vi khuẩn và nước peptoned. Được đặt trong một tấm Agar. Và lây lan trên đĩa bằng cách lật trong mô hình được hiển thị.

Mục đích của việc đếm đĩa là để ước tính số lượng tế bào hiện diện dựa trên khả năng của chúng. Để làm phát sinh các khuẩn lạc theo các điều kiện cụ thể của môi trường, nhiệt độ và thời gian dinh dưỡng. Về mặt lý thuyết, một tế bào sống sót có thể làm phát sinh một thuộc địa thông qua sự sao chép.

Tuy nhiên, các tế bào đơn độc là ngoại lệ trong tự nhiên. Và rất có thể là tổ tiên của thuộc địa là một khối lượng tế bào được lưu lại với nhau. Ngoài ra, nhiều vi khuẩn phát triển trong chuỗi (ví dụ Streptococcus ) hoặc các khối (ví dụ Staphylococcus ). Việc ước lượng số lượng vi sinh vật theo CFU trong hầu hết các trường hợp. Tính toán số lượng tế bào sống có trong một mẫu vì những lý do này. Điều này là do việc đếm CFU giả định rằng mỗi thuộc địa là riêng biệt. Và được thành lập bởi một tế bào vi sinh vật duy nhất khả thi.

Cfu là gì và cách Sử dụng

Các đơn vị tạo thành khuẩn lạc được sử dụng để định lượng kết quả trong nhiều phương pháp đếm và mạ vi sinh:

  • Phương pháp Pour Plate trong đó mẫu được lơ lửng trong đĩa petri. Sử dụng thạch nóng chảy nguội đến khoảng 40-45 ° C. Sau khi thạch dinh dưỡng rắn hóa đĩa được ủ.
  • Phương pháp Spread Plate trong đó mẫu (trong một thể tích nhỏ). Được trải rộng trên bề mặt của đĩa thạch dinh dưỡng và để khô trước khi ủ để đếm.
  • Phương pháp màng lọc trong đó mẫu được lọc qua màng lọc. Sau đó bộ lọc được đặt trên bề mặt của đĩa thạch dinh dưỡng (vi khuẩn hướng lên). Trong quá trình ủ chất dinh dưỡng thấm qua bộ lọc để hỗ trợ các tế bào đang phát triển. Vì diện tích bề mặt của hầu hết các bộ lọc ít hơn so với một đĩa petri tiêu chuẩn. Phạm vi tuyến tính của số lượng tấm sẽ ít hơn. 
  • Phương pháp Miles và Misra hoặc phương pháp thả tấm trong đó một lượng rất nhỏ (thường khoảng 10 microliters). Mẫu từ mỗi lần pha loãng trong loạt được đưa vào đĩa petri. Các món ăn thả phải được đọc trong khi các thuộc địa rất nhỏ để ngăn chặn sự mất mát của CFU khi chúng phát triển cùng nhau.

Tuy nhiên, với các kỹ thuật yêu cầu sử dụng đĩa thạch. Không thể sử dụng dung dịch chất lỏng vì không thể xác định được độ tinh khiết của mẫu vật. Và không thể đếm từng tế bào một trong chất lỏng.

Công cụ đếm thuộc địa Cfu là gì

Cách truyền thống liệt kê các CFUs bằng một “click-counter” và một cây bút. Khi các thuộc địa quá nhiều, thực tế phổ biến là chỉ đếm các CFU trên một phần của món ăn.

Việc đếm các thuộc địa được thực hiện theo cách thủ công bằng bút và một bộ đếm. Đây thường là một nhiệm vụ đơn giản, nhưng có thể trở nên rất mất thời gian khi nhiều đĩa phải được liệt kê. Ngoài ra, có thể sử dụng các giải pháp bán tự động (phần mềm) và tự động (phần cứng + phần mềm).

Phần mềm đếm CFUs (CFU là gì)

Các thuộc địa có thể được liệt kê từ hình ảnh các tấm bằng các công cụ phần mềm. Các nhà thực nghiệm nói chung sẽ chụp ảnh mỗi tấm mà họ cần đếm và sau đó phân tích tất cả các hình ảnh. Vì phải mất ít hơn 10 giây để chụp một bức ảnh, trái ngược với vài phút để đếm CFU theo cách thủ công. Cách tiếp cận này thường tiết kiệm rất nhiều thời gian. Ngoài ra, nó là khách quan hơn và cho phép khai thác các biến khác như kích thước và màu sắc của các thuộc địa.

Phềm mềm đếm CFUs

  • OpenCFU là một chương trình miễn phí và mã nguồn mở được thiết kế để tối ưu hóa sự thân thiện, tốc độ và độ bền của người dùng. Nó cung cấp một loạt các bộ lọc và kiểm soát cũng như một giao diện người dùng hiện đại. OpenCFU được viết bằng C ++ và sử dụng OpenCV để phân tích hình ảnh. 
  • NICE là một chương trình được viết bằng MATLAB. Cung cấp một cách dễ dàng để đếm các thuộc địa từ hình ảnh.
  • ImageJ và CellProfiler : Một số macro ImageJ và các plugin và một số đường dẫn CellProfiler có thể được sử dụng để đếm các thuộc địa. Điều này thường yêu cầu người dùng thay đổi mã để đạt được luồng công việc hiệu quả. Nhưng có thể hữu ích và linh hoạt. Một vấn đề chính là sự vắng mặt của GUI cụ thể mà có thể làm cho sự tương tác với các thuật toán xử lý tẻ nhạt.

Ngoài phần mềm dựa trên máy tính để bàn truyền thống. Các ứng dụng cho cả thiết bị Android và iOS. Có sẵn để đếm đếm thuộc tính bán tự động và tự động. Camera tích hợp được sử dụng để chụp ảnh tấm thạch và thuật toán bên trong hoặc bên ngoài được sử dụng để xử lý dữ liệu hình ảnh. Và ước tính số lượng khuẩn lạc. 

Hệ thống tự động – Cfu là gì?

Nhiều người trong số các hệ thống tự động được sử dụng để chống lại lỗi của con người. Vì nhiều kỹ thuật nghiên cứu được thực hiện bởi con người. Nên đếm các tế bào riêng lẻ có nguy cơ cao bị lỗi. Do thực tế là các nhà nghiên cứu thường xuyên tự đếm các tế bào với sự trợ giúp của ánh sáng truyền. Kỹ thuật dễ bị lỗi này có thể có ảnh hưởng đáng kể đến nồng độ tính toán. Trong môi trường lỏng chính khi các tế bào có số lượng thấp.

Các hệ thống hoàn toàn tự động cũng có sẵn từ một số nhà sản xuất công nghệ sinh học. Chúng thường đắt tiền và không linh hoạt như phần mềm độc lập. Vì phần cứng và phần mềm được thiết kế để làm việc cùng nhau cho một thiết lập cụ thể. Ngoài ra, một số hệ thống tự động sử dụng mô hình mạ xoắn ốc .

Các đơn vị thay thế – Cfu là gì

Thay vì các đơn vị hình thành thuộc địa, các thông số có thể xảy ra nhất (MPN). Và các đơn vị Fishman đã sửa đổi (MFU)  có thể được sử dụng. Phương pháp số lượng lớn nhất có thể đếm được các tế bào khả thi và hữu ích. Khi liệt kê nồng độ thấp của các tế bào hoặc liệt kê các vi khuẩn trong các sản phẩm. Mà các hạt làm cho việc đếm đĩa không thực tế. Các đơn vị Fishman được điều chỉnh có tính đến vi khuẩn có khả năng sinh tồn. Nhưng không thể nuôi cấy được.